请教怎么配calcium校正溶液
我想配一系列calcium校正溶液，需要 K-EGTA 以及 Ca-EGTA， 以什么比例混合KCl 与 EGTA 以及CaCO3 混合于EGTA，我不知道，比如我要10mM K-EGTA 以及 10mM Ca-EGTA 该怎么配。另外个问题，我想in vitro测， 需要把校正溶液配在ACSF(artificial cerebrospinal fluid )里， 有人做过吗，能知道一下我吗。
差了些文献，没找到具体配法，因为涉及ph校正问题，会使某些离子含量增加，不知道怎么解决
希望有人能指导下我 配置K－EGTA溶液，称EGTA，KOH粉末，用盐酸来调节pH
或者称EGTA粉末，KCl粉末，用KOH调节pH
EGTA是负四价，而钾离子是正一，钙离子是正二价
所以没有办法配只有 10mM K+ 和10mM EGTA4－ 的溶液，里面肯定还需要其他正离子
你想in vitro测什么？ 谢谢楼上的回复，
我就是要拿活体切片来矫正细胞内calcium浓度， 我做钙成像。需要把calcium矫正液配在acsf里，再用ionomycin来平衡细胞内外calcium浓度。
请问这样话用NaOH 还是KOH滴定，这样改变了Na或者K的浓度了
请问你有这样的protocol吗，能不能给我传一份 老大你能否说的具体一些，你手头的初始溶液有哪些，浓度各是多少，目的溶液是什么，成分和浓度各是多少。做什么项目用。据我所知生物医学领域里这个好像一般都是直接从试剂企业买来的，德国这很少有自己配的，不然还要灭菌处理，你那里怎么这么穷啊。请说具体点。 回复 3# ophthalmology
如果我是你，我不会单单准备好10*的溶液，直接加入ACSF
我会准备做imaging记录的溶液1份
然后用ionomycin平衡的溶液，也就是已知钙离子浓度的溶液，单独准备一份working solution
在记录的当天加入ionomycin
你可以在记录完钙信号以后，再perfuse已经加入ionomycin的，已知钙离子浓度的溶液。
其实Na或者K离子浓度稍微变化一点，对钙离子的影响不大
因为他们都不和钙离子螯合。你要注意的是osmolarity不要变得太多，不然的话，溶液一旦和细胞不是isotonic，细胞的形状会变，对记录钙离子的信号有害无益
所以，如果你不放心，可以配好溶液后，测osmolarity。
还有就是你可以估算一下，加入NaOH或者加入KOH，其实并不需要很多离子，就可以是pH变化非常大。所以调节pH时候所加入的Na或者K，多数情况下可以忽略。
如果你问我要用NaOH还是KOH，那要看你的ASCF里面那个离子多。一般胞外是钠离子比钾离子多很多，那么我建议用NaOH调节。 回复 4# Kirschschoko
做Ca imaging的溶液，一般都是自己配的，而且不用做灭菌 谢谢neuron的回复
我没有说的很清楚，我要做一组Calcium已知浓度的溶液，8，9个不同的浓度吧。
我需要以此来测出我的calcium颜料的Kd值，以后就直接可以把荧光强度转换为calcium、浓度
所以我需要kEGTA(calcium=0) 以及Ca-EGTA (高钙浓度)原始溶液，然后把他俩以不同的比例混合直接得到我需要的calcium校正液，所以我不太知道这两个原始液怎么配，能跟我详细说说吗
也感谢Kirschschoko 的回复，不过可以买到的只是溶在
MOPS buffer里的，有时候不是什么特定溶液都能买到 回复 7# ophthalmology
我的意思是不要配那个原始高浓度的溶液
直接配working solution
一般Calibration不就用2个浓度就足够么？
Ca＝0；Ca＝2mM 我不是用Ca＝0；Ca＝2mM
我要做个标准曲线，把荧光强度和calcium的关系导出来
所以需要很多的不同浓度的标准溶液
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