pauliang 发表于 2010-3-30 17:46

呵呵,多谢!

matthiasB 发表于 2010-3-30 19:02

i am not specialized in ion channel or electrophisiology, but unfortunately i need to analyze some patch clamp results, which I can notreally understand.For example, when 2 uM quinidine was applied to the hERG transfected HEK293 cells (whole cell model), the resting potential increased dramatically even without additional pulse activation?

i am at home and can not type in chinese..

pauliang 发表于 2010-3-30 19:25

几个问题不明白:
1. Quinidine不是钾通道阻滞剂,其主要作用是阻断快Na通道,当然也可以阻断IKr,IKs等等。不是很明白为什么你们要给一个稳定转染HERG的细胞系用Quinidine?
2. 你们是做的Pacth,而且是全细胞模式记录的HEK293的电流,你是如何看到细胞的静息电位的?你是不是把Holding Potential和Resting Potential弄混了?

方便的话你可以把数据发给我,我抽空可以帮你分析一下(如果不是很多)。

matthiasB 发表于 2010-3-30 19:36

I did notdo the experiment. I do not really know what they did. They are physicist......Buti am sure what i meant was resting potential instead of holding potential coz they fixed the current and measure the voltage.............Qunidine is also a hERG blocker. We used it here just as positive control.

matthiasB 发表于 2010-3-30 19:53

我还是用input打中文吧。我作的不是常规的那个tail current recording.我们就是纯粹的测一个跨模电压。所以没有任何外加的电压pulse.我不能理解的是,既然连没外加电压那离子门就没inactivation or activation.但是尽管如此为杀那个resting potential 电压还会变呢

matthiasB 发表于 2010-3-30 20:00

我们家当家的foxtail ta 老公发过nature de.haha

pauliang 发表于 2010-3-30 20:13

Patch可以分两种:一种是钳住电压记录电流,一种是钳住电流记电压的变化。你们的就是后一种。就是说看在不同的电流下的电压大小。
因为当你给了一个电流时,细胞膜的电压就会有相应的变化的。
不知道这样说你明白了吗?
不过我还是不理解,为什么要用奎尼丁去阻断Iks。因为它毕竟不是特异性的钾通道阻断剂。

pauliang 发表于 2010-3-30 20:19

http://en.wikipedia.org/wiki/Electrophysiology
希望这个链接能够帮到你,看完以后要是还有不明白的可以发消息给我。

matthiasB 发表于 2010-3-30 20:22

quinidin我随口说的。。任何blocker都一样.只要是applied to the hERG transfected HEK293 resting potential都上升applied to the wild type HEK293 resting potential 都保持不变...........wei sha

pauliang 发表于 2010-3-30 20:26

你是说静息电位从比如-80上升到-60?这个我认为很好解释啊,因为你把钾通道阻滞了,所以在表达HERG的293细胞上静息电位会上升。而Wild type(如果这里wild type你是指没有转染的293细胞的话)的293细胞表面是几乎没有钾离子通道表达的,所以静息电位也就几乎不变。
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