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pauliang 发表于 2010-3-30 21:23

你可以去看看，你随便把胞内或者胞外的钾离子浓度改变一下，静息电位都会相应的变化的。

pauliang 发表于 2010-3-30 21:26

回复matthiasB
我理解你做的是全细胞记录下的电流钳
一般heterologous expression system中，转染的离 ...
neuron 发表于 2010-3-30 22:15 http://www.dolc.de/forum/images/common/back.gif

还是你的表达能力比我好啊。
理论上基本就是这样的，而且在HEK 293细胞膜上是几乎没有什么离子通道的。所以说表达的HERG通道是绝对占优势的离子通道。

pauliang 发表于 2010-3-30 21:33

说这个blocker妖呢是因为他是个complex （A+B), (A+B)一起呢会阻断那个通道，那个b呢从结构上有苯环环看着就 ...
matthiasB 发表于 2010-3-30 18:25 http://www.dolc.de/forum/images/common/back.gif

你是不是在做新药研发啊？
你们的假设不是说不可以，但为什么会认为直接加在电极内液里就会被细胞摄取呢？说不定这个阻断剂是一个竞争性的阻断剂，你前面的A只是个催化剂之类的，和A在一起时B的活性会增加100倍呢。

matthiasB 发表于 2010-3-30 21:34

我明天上班后能直接打中文了再来请教你们吧。。我还在纠解。用inputking太不方便了

pauliang 发表于 2010-3-30 21:35

以奎尼丁举例，其阻断效应和心率有显著依赖关系的。心率越快其阻断效果越好。具体的机制忘记了。
总之，关于阻断剂的阻断机制很复杂，有时候真是说不清楚。

neuron 发表于 2010-3-30 21:37

回复 52# pauliang


HEK 的背景通道还是很多的。。。很不幸。。。
好在HEK在表达外源蛋白质的能力很强。。。

pauliang 发表于 2010-3-30 21:41

请教楼上，HEK的内源性膜上钾离子通道很多吗？这个我还真是不知道。

neuron 发表于 2010-3-30 21:43

回复 28# matthiasB


会不是是open channel blocker？
有的离子通道阻断剂只能在离子通道开放的情况下阻断的
你可以先activate这个离子通道
然后apply blocker（s）

neuron 发表于 2010-3-30 21:50

回复 57# pauliang
你可以上pubmed看
不仅钾离子通道
proton channel， TRP channel。。。
你想呵，HEK是肾源性的细胞
肾。。。离子通道能少得了么。。。。。。

matthiasB 发表于 2010-3-30 21:51

NEURON同学的思路很清晰的表达能力也强。你来帮我分析分析哦。测量下来的数据是表达erg通道的hek细胞resting potential 在-70mV,不表达的普通的HEK resting potential在-10mV。到这里为止我都能明白因为在普通的HEK细胞里chloride conductivity predominate the resting potential. In the erg stably transfected HEK cells, the potasium conductivity predominate the resting potential.就如你们上面说的。但是我现在纠解的是在如果我把一个erg BLOCKER 加到 hERG-HEk, 那个resting potential 从-70除及到-20mV，，

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